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SDS-PAGE快速电泳缓冲液(20×,变性电泳,溶液型)

SDS-PAGE快速电泳缓冲液(20×,变性电泳,溶液型)

产品编号:TG200

产品规格:500ml

数量
价格 ¥0

SDS-PAGE快速电泳缓冲液(20×,变性电泳,溶液型)

●  产品组成:

货号

名称

规格

TG200

SDS-PAGE快速电泳缓冲液(20×,变性电泳,溶液型)

500 ml

说明书

一份

产品简介:

本产品为浓缩型SDS-PAGE快速电泳缓冲液,由Tris-Glycine电泳缓冲液优化而来,适用于Tris-Glycine体系(Laemmli体系)蛋白凝胶电泳。与传统的Tris-Glycine电泳缓冲液相比,使用本产品电泳时无需根据分离胶和浓缩胶调整不同电压,可全程200-250 V恒压电泳,约20-35 min可完成电泳(低于10%胶浓度),大大节约时间,并且对小分子蛋白分离效果更好,可使预染蛋白Marker中10 kD与15 kD条带分离并清晰可见(凝胶浓度8%以上),达到快速高效分离蛋白的作用。

本产品为20×浓缩溶液,使用前需要用超纯水稀释20倍后使用,无需调节pH值,pH 8.0-8.5。

贮存和效期:

常温贮存,常温运输,有效期1年。

用前必读:

1. 和传统的SDS-PAGE电泳液(Laemmli系统,1×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速电泳液可以大幅加快电泳速度,缩短电泳时间。推荐200-250 V恒压电泳,低于10%胶浓度凝胶通常20-35分钟就能完成电泳。

2. 使用快速电泳缓冲液单板胶电泳时,稳压200 V,起始电流在45-60 mA,如果同时电泳2板胶或者4板胶,电流会升高,请根据需求采取降温措施。

3. 对于低浓度例如6%、8%或10%的固定浓度胶,本快速电泳液比传统电泳液具有更好的分离效果,可以达到类似梯度胶的分离效果,更适合小分子量蛋白电泳,蛋白Marker 10kD条带清晰分离。产生相同分离效果时,使用本快速电泳液可使用浓度更低的分离胶,例如使用传统电泳液对10%、分离胶进行电泳时,使用本快速电泳液时对应的分离胶只需要8%即可,电泳效果基本一致,并且由于胶浓度较低,可以增强转膜效率,提高WB检测灵敏度。

4. 本快速电泳液含有SDS,适用于变性胶蛋白电泳,不适用于非变性电泳(Native-PAGE)。

5. 该快速电泳缓冲液建议用于经典Laemmli系统配制的凝胶,经测试可以达到最优的分离效果。对于其他电泳系统如Bis-Tris系统,HEPES系统,Tris-醋酸系统,Tricine系统等,需要经过验证测试后使用。

6. 本快速电泳液可以适当回收,回收后的电泳液可以作为外槽电泳液再使用1-2次。如果希望获得最佳的电泳效果,请勿使用回收的电泳液。内槽缓冲液每次都需要使用新鲜配制的电泳缓冲液。

使用说明:

1.  即用型1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液配制:

即用型1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液

1升配制量

5升配制量

20×电泳缓冲液

50 ml

250 ml

超纯水

定容至1

定容至5

即用型1×SDS-PAGE快速电泳液,建议4℃贮存,可保存1-2周。如果出现变色或沉淀请重新配制新鲜的电泳液。

2.  电泳条件:

全程恒压电泳,电压建议为200-250 V。一般情况下,恒压250 V电泳时,对于浓度为10%的分离胶仅需~22分钟即可完成电泳。如果需获得更加平整和锐利的条带,可以把电压调整为150 V,此时电泳时间需要适当延长。

电泳电压与电泳时间(min)对照表

Laemmli凝胶浓度

6%

8%

10%

12%

15%

200 V

~30

~30

~33

~40

~48

250 V

~18

~18

~22

~30

~35


实验示例:


       SDS-PAGE快速电泳液(TG190)用于各种浓度分离胶的电泳效果图
上图为各种浓度分离胶使用快速电泳液的效果图,
下图为相同凝胶使用传统的Tris-甘氨酸电泳液(TG120)的效果图。 
6%~15%的凝胶使用SDS-PAGE凝胶配制试剂盒配制(RTD6116)
样品:1,2 使用5×双色蛋白上样缓冲液 (变性,还原)(PL090)配制;
3 三色预染宽分子量蛋白Marker II(10-250 kD)(RTD6149),上样5 μl;
4 双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)(RTD6105),上样5 μl; 
电泳条件:恒压200 V



不同蛋白大小选择不同的分离胶浓度,参考下表:

Laemmli系统

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围(kD

1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液

最佳分离范围(kD

1×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液

6%

15-300

50-350

8%

10-250

35-300

10%

5-150

20-150

12%

3-100

15-100

15%

低于60

10-80



 
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